大鼠維生素B12(VB12)elisa試劑盒簡(jiǎn)介    

維生素B12又叫鈷胺素，是*含金屬元素的維生素。自然界中的維生素B12都是微生物合成的，高等動(dòng)植物不能制造維生素B12。維生素B12是*的一種需要一種腸道分泌物（內(nèi)源因子）幫助才能被吸收的維生素。有的人由于腸胃異常，缺乏這種內(nèi)源因子，即使膳食中來源充足也會(huì)患惡性貧血。植物性食物中基本上沒有維生素B12。它在腸道內(nèi)停留時(shí)間長(zhǎng)，大約需要三小時(shí)（大多數(shù)水溶性維生素只需要幾秒鐘）才能被吸收。維生素B12的主要生理功能是參與制造骨髓紅細(xì)胞，防止惡性貧血；防止大腦神經(jīng)受到破壞。維生素B12是B族維生素中迄今為止發(fā)現(xiàn)zui晚的一種。維生素B12是一種含有3價(jià)鈷的多環(huán)系化合物，4個(gè)還原的吡咯環(huán)連在一起變成為1個(gè)咕啉大環(huán)（與卟啉相似），是維生素B12分子的核心。所以含這種環(huán)的化合物都被稱為類咕啉。維生素B12為淺紅色的針狀結(jié)晶，易溶于水和乙醇，在pH值4.5～5.0弱酸條件下zui穩(wěn)定，強(qiáng)酸（pH<2）或堿性溶液中分解，遇熱可有一定程度破壞，但短時(shí)間的高溫消毒損失小，遇強(qiáng)光或紫外線易被破壞。普通烹調(diào)過程損失量約30%。

大鼠維生素B12(VB12)elisa試劑盒操作方法 

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。

2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。

3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。    

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